[求助]为什么评分很高的引物也和引物原则不一致
这个帖子发布于 19 年零 203 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
我用primer 5自动搜索了一对引物，上游： 5’ tga aca ccg ctc cca taa 3'
下游: 5'ggc tgt gcc att ccc taa ,评价结果如下
rating length Tm gc% activity degeneracy Ta opt
上游 100 18 54.9 50.0 32.0 1 --
下游 100 18 56.3 55.6 33.8 1 --
产物 98 999 99.6 47.4 -- -- 53.4
引物评分很高，但是两个引物3‘末端都是A,而引物原则讲最好是C或G，A容易引起碱基错配;而且，引物原则讲Tm值在72度反应条件最佳，而这对引物都在55度左右。不知道我说的有没有道理，请各位大侠赐教，小妹不胜感激 。另外请教一下，后面那三项是什么意思，有何意义。
下游: 5'ggc tgt gcc att ccc taa ,评价结果如下
rating length Tm gc% activity degeneracy Ta opt
上游 100 18 54.9 50.0 32.0 1 --
下游 100 18 56.3 55.6 33.8 1 --
产物 98 999 99.6 47.4 -- -- 53.4
引物评分很高，但是两个引物3‘末端都是A,而引物原则讲最好是C或G，A容易引起碱基错配;而且，引物原则讲Tm值在72度反应条件最佳，而这对引物都在55度左右。不知道我说的有没有道理，请各位大侠赐教，小妹不胜感激 。另外请教一下，后面那三项是什么意思，有何意义。
