单拷贝的人类人工染色体的有效形成

2024年3月22日《Science》发表一项研究：大 DNA 组装方法是合成原核生物和酵母芽殖染色体的里程碑式成就的基础。芽殖酵母通过约 125 碱基对 DNA 序列定义的中心粒控制染色体遗传，而哺乳动物和许多其他真核生物则使用大型表观遗传中心粒。利用中心粒表观遗传学可以形成人类人工染色体（HAC），但还不足以避免初始 DNA 分子在进入细胞后发生猖獗的多聚化。我们介绍了一种高效形成单拷贝 HAC 的方法。它采用了一个约 750 千碱基的构建体，该构建体足够大，可以容纳存在于内外中心粒的不同染色质类型，从而避免了多聚化的需要。通过采用酵母球形体融合技术，向哺乳动物细胞的输送得以简化。这些进展使得染色体工程能够在变温动物细胞中正确的进行。