WB His标签结果求助
发布于 2021-12-25 · 浏览 804 · IP 江苏江苏
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图1前3条泳道是转染的质粒目标蛋白23kd，后面泳道均是140kd蛋白，均带his标签，均为膜蛋白，裂解293T细胞后超声处理，用his抗体孵育后所有泳道均在140kd有条带，认为是非特异条带，可条带又很清晰，这是什么情况。
图2接着我们将140kd目标序列换到了带flag载体后140kd蛋白不同组别，表达量有差异，蛋白不煮的情况下条带似乎更好一些，但条带比较模糊，8%胶，转膜250mA 2h，50%脱脂奶粉室温1h，flag抗体4度过夜，二抗室温1h，还能怎么改进。实验了好几次都这样。
万般感谢！！！
图1
图2
最后编辑于 2021-12-25 · 浏览 804
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