关于在T细胞DNA删除环用RT-PCR方法的定量检测中RAG2和TRECs的标准质粒的构建的问题
发布于 2016-03-23 · 浏览 2468 · IP 辽宁辽宁
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诸位大神，本人初做RT-PCR检测T细胞DNA删除环的定量检测，在标准质粒以及阳性对照的制备中，即实时定量
PCR中, 需要制备标准质粒以产生标准曲线, 同时也需要阳性对照判定 PCR的结果. 在普通 PCR仪上进行 RAG 2 以及 TREC片段的 PCR, 分别获得 180 bp和97 bp的产物 ,胶回收纯化 PCR产物. 与 T- easy载体建立连接反应,产生 T- easy载体 + RAG 2 基因片段及T- easy载体 + TREC基因片段的质粒 ,蓝白斑筛选 ,转入感受态细菌扩增. 抽提纯化质粒. 酶切、PCR、 测序证实连接和 PCR产物的准确性......
我想问的是RAG2基因和TREC基因片段的具体序列以，我在PUBMED中的基因库中查的RAG2基因太大，大概有两万多bp，我想找公司代做标准质粒太大，所以想知道该实验中RAG2基因的具体大小及序列？是不是该实验中的会小点？还有就是同问TREC基因的序列和大小？
谢谢！！！
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2468
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