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【经验交流】脑中做基因转导该用什么病毒载体?

最后编辑于 2015-07-28 · IP 泰国泰国
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这个帖子发布于 9 年零 330 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
最近遇到好多临床的师弟师妹不知道脑神经中在体注射要用什么病毒?,很多人说什么师姐告诉他慢病毒注射侧脑室效果挺好的,还有什么什么文献里也写的慢病毒多点注射海马区域研究某某基因对学习记忆的影响等。我想告诉大家,目前在神经科学领域基本都是使用腺相关病毒来在体注射鼠脑的,至于为什么?看下面:
1.腺相关病毒比其他病毒效果要好很多很多:
下面是我用好几家公司的病毒在体注射海马CA1区域得到的结果,各种类型的病毒的差距非常明显,慢病毒在视野中仅能找到个位数的细胞被点亮,而且轴突等看的都不明显;腺病毒略好(图中为10次方的,11次方反而效果不好,出现大量炎症反应);而腺相关病毒可以将整个海马CA1区域都点亮,而且神经元的轴突都看的清清楚楚。

img


img


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慢病毒(9次方1ul)
腺病毒(10次方1ul)
腺相关病毒(12次方0.4ul)
(私人图片,不得盗用)

2.腺相关病毒和其他病毒的相比对实验者而言要安全的多:
而且我们现在之所以更倾向于使用腺相关病毒,还有个好处,就是其对操作病毒的人员的安全性极高,基本即便操作中出现失误,感染了实验的腺相关病毒,目前也没有导致过任何疾病,而且非整合的病毒,很容易代谢掉,而常规的慢病毒,可以感染人体并长期整合基因组,会有导致白血病的风险。不过腺相关病毒确实有2个致命的缺点,一个是基因容量小,稍大的目的基因装不进去;一个是感染表达高峰到来时间慢,非常不适合神经发育方面的研究使用。所以如果遇到这2个问题,目前可能只能用腺病毒来代替。
慢病毒
腺病毒
腺相关病毒
是否整合
随机整合
非整合
非整合
表达丰度
在体感染率
极低
极高
表达时间
较快(2-4天)
快(1-2天)
慢(>15天)
病毒滴度
1X108~10TU/ml
1 X1010~11PFU/ml
1 X1012~13vg/ml
基因容量
操作风险
有致癌风险
易产生炎症反应
目前未发现有致病性





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