我用PET21a连接一个680bp的片段，片段两端带有NdeI和BamHI位点，现在测序证明已经连接上了，因为还要连接另外一个片段，连了一次连不上，我查找原因，我分别用BglII、NdeI单酶切（见图泳道1,2），并用NdeI和BamHI双酶切（见泳道3），发现NdeI切的比BglII片段小点，用NdeI和BamHI双酶切电泳没有看见680bp大小的片段啊，而且用NdeI和BamHI双酶切后质粒大小似乎和单酶切的差不多，求大侠知道。（注:所有酶切的质粒均为测序证明正确的质粒，Marker为DL5000，跑的不好），marker右边大家可以不管。谢谢
