连接转化提质粒浓度低，酶切无条带
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1.连接体系 目的片段3.5μ，灭菌水0.5μ，pmd 20-T 1μ，mix 5μ，16度连接过夜
2.转化 DH5α 50μ 加入连接产物1μ，冰浴30min，42度热激90s，冰浴2min，添加soc培养基到1ml，37度200rpm振荡培养1h，离心，弃掉800μ上清，富集菌液后取10μ划线涂板LB有氨苄抗性，37度过夜培养
3.挑取单个菌落，10ml氨苄抗性LB液培，37度225rpm摇菌培养12小时，浑浊
4.2ml菌液提质粒，omega小提试剂盒，提出质粒浓度不到10ng/ml
最后编辑于 2021-05-24 · 浏览 3780
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