【求助】RT-PCR后做电泳，没有目的条带（520bp），却出现100bp条带？
这个帖子发布于 14 年零 163 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
各位大侠，我做的实验是从大鼠胰腺提取RNA，做RT-PCR，目的基因是PDX-1。在做完梯度PCR（60-65°）做电泳的时候，却出现了没有目的条带，但每个孔均出现100bp左右的条带？不知是否原因引起。
我现在最担心的是引物问题，引物是我自己设计的，请各位大侠帮我看看，设计的可合适？
大鼠PDX-1（NM-022852），上游：GGA AGA TCT ATG AAC GCT GGA ACA GGG AAG T
下游：CCC AAG CTT CCG AGG TTA CGG CAC AAT C
因为之后要做载体构建的问题，所以上游含BglⅡ，下游含HindⅢ 位点。
紧急求助各位师兄师姐了~~~~~先谢谢大家了~~
我现在最担心的是引物问题，引物是我自己设计的，请各位大侠帮我看看，设计的可合适？
大鼠PDX-1（NM-022852），上游：GGA AGA TCT ATG AAC GCT GGA ACA GGG AAG T
下游：CCC AAG CTT CCG AGG TTA CGG CAC AAT C
因为之后要做载体构建的问题，所以上游含BglⅡ，下游含HindⅢ 位点。
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