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琼脂糖凝胶电泳做基因鉴定杂带多是咋回事?

发布于 2021-07-04 · 浏览 3811 · IP 广东广东
这个帖子发布于 3 年零 302 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

各位朋友:我最近在做敲基因小鼠鉴定,通过基因型鉴定,剔除野生型(仅1.4kb)和杂合子(1.4kb和0.8kb),最后获得纯合子(仅0.8kb)小鼠。如图,鼠尾提取DNA后进行PCR扩增,然后拿扩增产物(目的DNA)进行琼脂糖凝胶电泳。结果1.4kb出现很多杂带,而0.8kb处比较纯净,无杂带。请问杂带是怎么回事?(不加模板DNA的泳道显示应该无污染)。如图所示,我没有一个纯合子(仅0.8kb者)?(PCR扩增条件:预变性94℃ 1min,变性98℃ 10s,退火60℃ 15s,延伸68℃1.5min)

img

(现在将基因敲除小鼠鉴定方法protocol分享给大家,希望对同行有所帮助!具体见附件)

基因敲除小鼠鉴定-蛋白酶K裂解法.pdf (132 KB)
基因敲除小鼠鉴定-碱液裂解法.pdf (186 KB)

最后编辑于 2023-03-19 · 浏览 3811

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