【求助】为什么没有转化结果

把目的DNA和PGL3载体双酶切，然后粘端连接（载体比目的基因为1;10）连接产物转化到大肠杆菌里扩增（有抗氨苄青霉素基因）。阳性对照很好，但是涂连接产物的抗性平皿上一个菌落都没有，请教会是哪方面问题啊。