【求助】我的质粒为什么没法纯化?
我大量提取的三个质粒(pCDNA3.1空质粒,pCDNA3.1中分别插入一700bp和一3400bp的外源片段构成的两重组质粒),采用PEG8000纯化(13%的PEG8000含1.6mol/L NaCl,本实验室的惯用纯化试剂,在我之前都能将大提质粒纯化至只含超螺旋结构),可我纯化后三个质粒跑电泳总还都是两条带,亮度相当。重复过好几次,换用过别人刚用过的PEG8000,也将三质粒重新转化后再试过,都无济于事。我的质粒是要用来做DNA疫苗免疫动物的,超螺旋结构才能吸收好。我师姐曾用pCDNA3.1构建过类似的三质粒,提取时没出现过这种情况,我怀疑是否是我构建时质粒发生了什么突变?:(各位请帮忙分析一下,不胜感激!