【专题讨论】免疫沉淀后出现的污染条带
我用的是兔血清先和细胞裂解液孵育 -》
加入Protein A 孵育 -》
离心,漂洗Protein A,在上样buffer中煮样 -》
SDS-PAGE -》
western 检测目的蛋白是否被沉淀下来。
western检测时发现72KD以上一长条染色很深的带,如图中红框标出的(当然不是我的目的条带)。我想去掉这种背景,但想不出这是什么东西,特向有经验的前辈们请教。谢谢。
注:应该不是抗体的带,因为跑胶时DTT浓度为100mM,抗体应被还原成55,25KD两种带。
