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【专题讨论】免疫沉淀后出现的污染条带

最后编辑于 2022-10-09 · IP 湖北湖北
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这个帖子发布于 18 年零 228 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
最近在做免疫沉淀的实验。
我用的是兔血清先和细胞裂解液孵育 -》
加入Protein A 孵育 -》
离心,漂洗Protein A,在上样buffer中煮样 -》
SDS-PAGE -》
western 检测目的蛋白是否被沉淀下来。

western检测时发现72KD以上一长条染色很深的带,如图中红框标出的(当然不是我的目的条带)。我想去掉这种背景,但想不出这是什么东西,特向有经验的前辈们请教。谢谢。

注:应该不是抗体的带,因为跑胶时DTT浓度为100mM,抗体应被还原成55,25KD两种带。
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