WB跑出了内参蛋白，但是目的蛋白没有
丁香园临床病例数据库
证书编号：
CXY70JI
您的案例《WB跑出了内参蛋白，但是目的蛋白没有》 经同行评议，被丁香园临床病例数据库收录。
收录时间 2025年5月19日
长按识别二维码
查看病例
查看病例
这个帖子发布于 4 年零 311 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
介绍一下我的实验流程
样品:组织样品
提取蛋白:此过程都在冰上操作
ripa裂解液（强）300μL
蛋白酶抑制剂:3μl
磷酸酶抑制剂:3μL
超声，4℃离心30min 14800rpm
5× SDS:1:4,100℃水浴煮6min -20℃保存
上样量:7ul
电泳:12% SDS-PSAE凝胶，80V30min
100V跑到底
转膜:湿转，PVDF膜，300mA，70min
封闭:5%脱脂牛奶1h
一抗: ASIC31:400 TNF:1:1000
内参GAPDH:1:1000
孵育16h
二抗:1:8000
上图是跑出来的GAPDH
但是目的蛋白没有跑出条带
想求问大神们，是什么问题，求救求救，已经跑了8块胶了
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 7111
