WB蛋白怎么煮？

为啥要“煮”蛋白呢？

其实这是为了让SDS和蛋白充分结合，是蛋白质完全变性并解聚，形成棒状结构并带上负电荷，从而可以在电场中移动；SDS还能断开氢键，破坏二级和三级结构，使得蛋白质的电泳速度只跟分子量的大小有关。通常煮蛋白的条件是100℃，5min。

如果煮蛋白时间过长过短会怎样呢？时间过短肯定是反应不完全，如果一不小心煮蛋白时间过长，样品会蒸发很多，如果盖子崩开蒸发会更多，直接导致的一个后果是蛋白浓度定量不准确，对于一些浓度大的蛋白样品可适当延长煮蛋白时间。

另外，煮蛋白后还可能会出现结块的现象，这种现象可能是由于蛋白样品浓度过高，已经超出了SDS可以结合的浓度，将样品稀释即可。