WB电泳后在电转液中泡一个小时，会造成蛋白弥散吗

电转后，忘记开启电源。

取出时发现一块，膜上无蛋白，于是又放回重装再次电转。电转后内参几乎不可见，也不见目的蛋白。其中一个膜两面marker不齐，请问是电转的问题吗

还是一抗过期，我每次加1ul新的。