复性的蛋白在PBS中析出怎么办？

目标蛋白表达在包涵体，通过尿素浓度梯度透析的方法进行变复性：

①样品浓度500ug/ml，尿素浓度梯度为8M-6M-4M-2M，每个浓度透析6h，离心无明显沉淀；

②取上清，在Tris-HCl（50mM Tris，100mM NaCl，pH 8.0）中透析6h，离心无明显沉淀；（取上清，SDS-PAGE能明显看到目标蛋白的条带。纯度80%以上）

③取上清，在100mM NaCl中透析过夜，未观察到明显沉淀；

④取出透析袋，往透析液中添加NaCl使终浓度为137mM（PBS中的盐浓度），溶解后将透析袋放入透析4h，出现大量白色沉淀。（之前用PBS透析过，也会大量析出，所以想看一下是不是盐浓度的影响）

问题：

①目的蛋白是否复性成功？

②目的蛋白是否因盐析效应析出？

③蛋白发生盐析时的离子强度与什么有关？

④如何避免目标蛋白在后续细胞/动物实验中发生沉淀？（做过细胞实验，将样品加入DMEM培养基也会析出）

求大神指教，感激不尽！