【求助】请教蛋白磷酸酶实验
发布于 2006-09-27 · 浏览 566 · IP 广东广东
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请问各位，我现在要把一个磷酸化蛋白用磷酸酶去磷酸化，检查两种状态的分子量变化情况。
请问该如何进行操作呢？
附：我现在用的办法：首先用IP把目的蛋白分离出来，然后用磷酸酶作用，使其去磷酸化，然后做western blotting检测两种状态的蛋白差异。但是没有做出来。
我自己分析的原因有:
1. 不能确定IP分离的蛋白是否磷酸化
2. 不确定磷酸酶的操作步骤是否正确
请各位高手指点一下，谢谢！
请问该如何进行操作呢？
附：我现在用的办法：首先用IP把目的蛋白分离出来，然后用磷酸酶作用，使其去磷酸化，然后做western blotting检测两种状态的蛋白差异。但是没有做出来。
我自己分析的原因有:
1. 不能确定IP分离的蛋白是否磷酸化
2. 不确定磷酸酶的操作步骤是否正确
请各位高手指点一下，谢谢！
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 566
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