【求助】如何选择适当的细胞标记 请各位不吝赐教!
1.GFP或 Lac Z/neo转基因小鼠:首选,但不知从哪里可以买到。曾问过上海南方模式生物科技,但他们的GFP转基因鼠表达谱中不包括肺,有谁知道其他地方有全身表达GFP的转基因小鼠吗?另外,有文献提到用GFP转基因鼠做细胞标记时,移植受体内细胞可以自发荧光,从而造成假阳性,请问如何克服这种不足?
2.PKH26/PKH67和CM-DiI:这两种膜表面标记物除了在价格上的差别,各自的优势有哪些?在做细胞类型鉴定时,可以像GFP那样做双重荧光或双重酶标吗?是否也存在假阳性的问题?
3.GFP基因转染/感染:是否用病毒载体进行GFP感染更合适,感染后表达时间能持续多久?腺病毒载体和逆转录病毒载体有啥区别?从来没做过这方面的实验,不知感染的效率、难易程度、感染耗时长短如何。有无构建好的GFP病毒载体可买啊?
4.Y染色体原位杂交:原位杂交好做吗,与其他标记方法比有啥优势/劣势?
5.分析结果时,是否用冰冻切片好些?因为肺脏是空腔脏器,所以做冰冻切片后形态不是很好,用石蜡切片可以吗?
提了一堆问题,让大家费神了。还望各位不吝赐教啊!