肿瘤细胞与免疫细胞共培养答疑帖

本人临床医学专硕，因为整个实验室都没有人做过免疫学相关实验，只能自学。历时40多天，白天上班，晚上研究肿瘤细胞与免疫细胞共培养相关知识并进行实验，现在已初步获得结果。从设计实验，到挑选购买试剂等都是亲力亲为，天天1点睡7点起，一个多月瘦了5斤，整个过程回想起来仍然觉得十分艰辛。刚要做共培养实验时，第一个念头就是园子上看大神攻略，但发现要么年代久远要么内容不全，我熬过了最艰难的时期，现在打算把自己在“肿瘤细胞与免疫细胞共培养”的经验总结出来，供各位参考借鉴和讨论，如果内容有错误，请一定指出来，我也要和大家一起学习。

对了，本人研究的是肿瘤细胞的免疫逃逸，功能试验做的都是免疫逃逸方面的。

暂定以下内容：

1.肿瘤细胞与免疫细胞共培养的基础知识，以及实验完整思路

2.各个实验的详细步骤，以及试剂的选择（没有收广告费）

2.1 PBMCs的提取

2.2 从PBMCs中纯化目的免疫细胞

2.3 免疫细胞的激活、增殖与培养

2.4 下游实验

2.4.1 NK细胞相关下游实验

2.4.2 CD8+细胞相关下游实验

暂定这么多内容，后面根据大家的提问，新增内容。

最近临床、实验、论文、考试都要兼顾，忙的有点晕头转向，内容不定期更新。有急着问的可以留言或者私信。

2021年1月11日更新：怎么也想不到我会成为鸽王（掩面痛哭），从疫情返校后一直忙碌到现在，睡眠严重不足，头发大把大把的掉，前些日子还发现长出了白头发。。。帖子开了后，一忙碌我就给忘了，最近上线看到了很多朋友的回复和私信，深感愧疚，我把材料大致的整理了一下，供大家免费下载，参考。

具体的步骤，原理等讲解，估计要等今年4.5月份才能得空了。

再次更新：我又整理了下文献，文献都是1区的，内有大致的实验方法和思路，可供大家参考

2021.09.23更新：毕业这段时间非常忙，差一点就失业了，现在工作已经稳定，想起鸽了一年的帖子，我将毕业论文的实验步骤部分粘贴了出来，名字为“外周血免疫细胞的提取，纯化，激活”给大家一个实验的思路，供大家参考。由于毕业论文要降重，我放上来的是最终版，做了大量的删减和改动，读起来可能不那么顺口，请大家见谅。附件名称叫“完整实验步骤”。

“实际说明书”文件夹里面是每个试剂的官方说明书（部分说明书我有放翻译版本），大家做实验时还是要按照试剂的说明书来。