【求助】DC培养流式标本准备
这个帖子发布于 19 年零 2 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
我的DC培养流式标本准备如下：
1．收集培养的细胞至EP管。
2．培养的细胞用冷PBS离心（1000转, 5min），冲洗2次。
3．取25ul的细胞到流式分析管。
4。一管加PE-CD14、FITC-CD83 直标抗体各5ul，另一管加鼠同型抗体FITC、PE各5ul.
5。放置于4度冰箱内避光标记30min.
6。每管加4mL的冷PBS离心（1000转, 5min），冲洗2次。
7。吸弃上清，加0.5mL1%的多聚甲醛固定。流式细胞学检测。
请教各位战友：以上步骤正确吗？在流式抗体标记前后冲洗都用冷PBS可以吗？PBS中是否必须加2%血清以中和非特异性结合？
1．收集培养的细胞至EP管。
2．培养的细胞用冷PBS离心（1000转, 5min），冲洗2次。
3．取25ul的细胞到流式分析管。
4。一管加PE-CD14、FITC-CD83 直标抗体各5ul，另一管加鼠同型抗体FITC、PE各5ul.
5。放置于4度冰箱内避光标记30min.
6。每管加4mL的冷PBS离心（1000转, 5min），冲洗2次。
7。吸弃上清，加0.5mL1%的多聚甲醛固定。流式细胞学检测。
请教各位战友：以上步骤正确吗？在流式抗体标记前后冲洗都用冷PBS可以吗？PBS中是否必须加2%血清以中和非特异性结合？
