「关于THP-1细胞的培养心得」
1.关于形态:THP-1单核细胞为悬浮的体积较小、透亮的圆形细胞;THP-1巨噬细胞为体积较大、中心较暗的圆形或椭圆形细胞,且形状不规则,少数细胞伸出伪足成为梭型,呈现巨噬细胞形态。
2.关于分化:PMA可诱导其分化,中文文献中常用浓度是100ng/ml 48h,撤去PMA后THP-1巨噬细胞不能恢复至单核细胞形态,同时细胞失去增殖活性。
3.关于培养:个人感觉THP-1细胞比较敏感,容易受到外界的刺激,即使是更换血清和1640培养基的品牌也需要一周左右时间适应,有时可能会出现自动贴壁的情况。推荐使用进口血清和进口1640,且细胞适应后不要随意更换。
4.关于传代:实验室收到新细胞前期或者复苏前期,传代密度为0.5M/ml;后期等细胞稳定后可降至0.3M/ml,最好不要低于0.2M/ml。推荐使用半换液的方法进行传代,1周-2周离心一次细胞,细胞可维持较好的增殖。
5:关于β-巯基乙醇:个人经验,β-巯基乙醇的添加属于非必须。
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