中性粒细胞贴壁和培养时间的问题
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各位老师好，本小白最近在做中性粒细胞NETs，在中性粒细胞贴壁上遇到了困难。
1.我用的是多聚赖氨酸处理的玻片，想请教一下加入中性粒细胞后的贴壁时间，是用涂片的方式还是加入培养基培养贴壁的方式？时间大概是多久呢？
2.由于贴壁后要用其他细胞上清液进行共培养，有老师做过这种吗？请问共培养大概需要多少时间呢？
3.刺激形成NETs后，若想用wb进行验证，是直接提取中性粒细胞总蛋白，还是进行离心后上清液的总蛋白呢？
4.最近做中性粒细胞实验总是抽自己的血进行分离，感觉有点吃不消了😭请问有更好的获得中性粒细胞的办法吗？
感谢各位老师指点
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