[求助]肝脏TGF-B信号传导研究方法求助.请高人指点

目前可以查到的文献中发现dd(一种病原体)主要侵犯肝脏,在小鼠 实验中墨西哥的科学家发现肝组织中IL-10和TGF-B比空白对照组要升高(方法为RT-PCR).

而国内一学者发现在人的肝脏病变中,用免疫组织化学的办法,
A. 靠近pathogen 体侧纤维囊壁中,TGF-β1、TNF-α的阳性细胞表达率分别为(10.24±2.90)%、(16.22±2.84)%。

B.靠近肝实质侧纤维囊壁中,TGF-β1、TNF-α的阳性细胞表达率分别为(37.51±7.45)%、(25.76±5.05)%。TGF-β1、TNF-α在2层中表达的差异均有显著意义(P<0.01)。

靠近肝实质侧纤维囊壁中TGF-β1与TNF-α之间表达的差异也有显著意义(P<0.05)。

肝pathogen周围纤维囊壁经免疫印记分析80％有OPN(osteopontin,OPN)表达,形态学观察集中分布于近pathogen体侧纤维性囊壁(内层),与近肝侧纤维性囊壁(外层)比较有显著差异(75％ vs 8．3％, P<0．05)．

请问该如何设计课题:
1. 我会用RT-PCR及免疫组织化学在小鼠实验上对TGF(血清和肝组织)和OPN进行证实,

2.处死大鼠,取肝组织作病理学检查,免疫组化检测TGFβ1及其受体TβR Ⅰ,TβR Ⅱ的表达, RT-PCR检测胞内信号蛋白Smad3,Smad7以及 Coila2 mRNA的表达．

下面该增摸办?