求助 蛋白纯化
请问有人做细胞色素P450蛋白的原核表达吗?
目前想要在大肠杆菌中纯化得到这个蛋白,它带有MBP标签,通过小量检测,SDS-PAGE跑胶,和空载或者未诱导组相对比,相应分子量的条带没有明显差别,看起来像是杂带。我换了不同的感受态细胞,以及诱导时间和温度都没有明显的改善。
后面打算再换几个感受态尝试一下,如果还是不行的话,想要换个载体试试看,这样会有用吗?
有很多不太懂的地方,希望能得到大家的一些建议和指导,谢谢。
请问有人做细胞色素P450蛋白的原核表达吗?
目前想要在大肠杆菌中纯化得到这个蛋白,它带有MBP标签,通过小量检测,SDS-PAGE跑胶,和空载或者未诱导组相对比,相应分子量的条带没有明显差别,看起来像是杂带。我换了不同的感受态细胞,以及诱导时间和温度都没有明显的改善。
后面打算再换几个感受态尝试一下,如果还是不行的话,想要换个载体试试看,这样会有用吗?
有很多不太懂的地方,希望能得到大家的一些建议和指导,谢谢。
