[求助]还是转膜问题

这两次western显色不仅没有条带，而且非常干净，就像一张新空白片子洗出来的一样，

我今天把转膜后的胶考染了下看，完全不理解是怎么回事：一些泳道上没有条带，而另外一些泳道上还有很多非常清晰的条带。这是不是说有些泳道转过去了而另外一些没有呢？

转膜条件：
12％胶，50KD蛋白，半干法（EC），转移液tris 25mM, glycine 192mM, 甲醇20％（从分子克隆上抄的），NC膜0.45um，120mA恒流35分钟，电压在11-14V间波动。预染marker可以看见转过去了而且胶上没有颜色剩余。我以前也是这样的条件可以做出来，但不知道为什么现在显色什么都没有！
转膜为什么会一些转过去而一些没有呢？应该怎么样调整呢？