[求助]怎样找用于引物设计的mRNA全序列?
第一、用于引物设计用的mRNA是否一定要该目的基因的mRNA全长序列?我在NCBI中找到的mRNA有些只说明是那个因子的mRNA,有些还标明complete CDS,但往往那些标有complete CDS的反而更短,且没有多聚腺苷酸尾,还有那些没标到complete CDS的mRNA也长度不一,我想知道究竟那个才是可用于引物设计的mRNA?
第二、可能这个问题是引物设计的原则问题,但我查了好些资料都没找到相关介绍。引物设计时上下游引物是否都要设地密码子区(Codon)或都在非密码子区,因为有些因子的mRNA虽然很长,但密码子区却很短,如果一定要在密码子区设引物的话恐怕不易,不知是否可以一条引物设地密码子区,另外一条就设在非密码子区,以上的做法有什么区别吗?希望那位热心的园友帮一下忙,先谢过了。