成品感受态细胞冻融一次后为什么会失效，原理是什么

之前把这个成品感受态大肠杆菌从一个实验室转移到另一个实验室时，只用了冰袋，路上花了1小时，菌肯定解冻了，然后又冻起来，后面转化质粒实验用的时候，涂抗性平板后没有菌长起来。问了厂家说冻融后感受态会失效，原因是什么，我不理解。我想着感受态就是氯化钙溶液里悬着大肠杆菌，为什么冻融后，它就不是感受态了。现在很困惑，就向丁香园上的大家求助，谢谢大家了。