Wb目的蛋白跑不出来,但是内参有,求方法
目的蛋白:100kda左右的膜蛋白
用RIPA裂解液30min
70℃加热15min
转膜:400mA 90min
封闭:5%牛奶 30min
一抗按说明书1/2000,抗体稀释液稀释,4℃16小时
二抗常温孵育1小时
内参是b-actin
(图片左边是内参,右边是目的蛋白,一片空白)求指导

最后编辑于 2023-08-04 · 浏览 799
目的蛋白:100kda左右的膜蛋白
用RIPA裂解液30min
70℃加热15min
转膜:400mA 90min
封闭:5%牛奶 30min
一抗按说明书1/2000,抗体稀释液稀释,4℃16小时
二抗常温孵育1小时
内参是b-actin
(图片左边是内参,右边是目的蛋白,一片空白)求指导
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