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pET28a+纯化蛋白后WB用anti-HIS总是能杂出5KD的杂带,还很浓

发布于 2023-07-18 · 浏览 2743 · IP 北京北京
这个帖子发布于 1 年零 298 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
iconyj1984ren 推荐
  1. 我的目标蛋白10KD,插入酶切位点选用的是NcoI和BlpI,选这两个酶切位点是因为可以将载体本身带有的His标签切去,并防止空载蛋白的表达
  2. 选用Ni柱进行纯化,之后也过了离子交换和分子筛,但是这个5KD的条带始终存在
  3. 此图是过Ni柱是用不同梯度咪唑洗脱后留样进行WB
img

4.此图是经过离子交换和分子筛后进行WB

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最后编辑于 2023-07-18 · 浏览 2743

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