小片段连接构建载体一直连不上

我是合成的两条单链，打算用同源重组的方式构建到载体上，两条单链中的一条链是由所要连接的载体同源壁15bp➕酶切位点➕我要连接到载体上的小片段40bp，另一条链同理，两条单链以引物的形式收到，后面我直接将两条链稀释后各加一些组成20μ体系去pcr用相应的退火程序退火，产物直接与双酶切回收纯化后的载体用重组酶连接，因为小片段的原因，鉴定我也设计了这个小片段上面的引物，但是由于小片段是串联序列的原因，菌落鉴定时特异性不好，但是用载体通用引物上游和片段上的引物下游，可以p出条带，大概五六条条带，目的位置也有，就去送测序了，结果就是小片段不存在，接着我检查是不是空载，结果也不是，连上去了一些乱七八糟的序列，是不是我的退火程序有问题，应该加退火缓冲液，亦或是连接过程的问题？希望各位大神帮忙指点一下，这个弄了俩月了附上一张鉴定图