Wb经验帖‖常见问题汇总（二）干货

接着上一期，继续骗赞，骗关注。

(总体思路是，

一、条带整体歪的？怎么回事？

首先考虑你的胶贴压的不好，分离胶就是歪的。

贴膜的时候，你贴歪了。

条带能用吗？

可以用，什么情况可以用？

整体是一条线的歪，不要是折线的弯度。

还有一种现象就是，我的是一个两个条带出现弯曲变形？

主要考虑一个局部因素，重新跑。建议两边用marker或loading buffer封边。

(这里说一个见闻，有些实验室他用的“marker”是用marker和loading buffer稀释混合的，我们是纯的。）

二：条带奏眉（n型），还有拖尾现象？哑铃状？蝌蚪型？

皱眉和拖尾主要考虑一个，胶孔底部有气泡，在配件的page1经验帖我们讲过了，这个是标准，不能用，不点样！

哑铃状，胶配置问题，重新配，或者是重新换一个样品，因为你的样品估计有杂质了，还有一个裂解的可能性。

三：抗体和电泳液等使用次数问题

电泳液、转膜液用的话，最多6次，不要太多次了。抗体的使用次数10次左右。

牛奶尽量现配，当天配。不超过三天用完。

四：转膜的时候，三明治的海绵一厚一薄，滤纸也是一厚一薄。

五：实验室的时间要求，还有一些要求都是特定的，有人跑20kd的蛋白来问我用什么电压，用什么电流，多长时间？我也不知道啊。因为你根据大家普遍的来啊，我前面怎么说的怎么用啊，就差不多啊，我15kd的的就是啊，跑得很好啊，不可能15我跑一个电压，20跑一个，25跑一个，哪有那么多的细节，我不是开发实验的人，请注意问问题的角度，我说让她看帖子，可能这样说，说的她不太高兴，没有去理我，我也不在意。

实验室发现问题很重要，不是每个问题都很重要，你要想想你的问题是问题吗？

对事不对人，如果有冒犯，请原谅，你吵，就是你对的，你永远对！

六：如果有其他的我会接着补充