颅骨缺损(CD)大鼠模型构建和评价

原型物种：人

来源：颅骨钻孔法

模式动物品系：SPF级SD大鼠，健康，6~8W，雄性，体重180g-200g

实验分组：实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组

实验周期：6w

建模方法

建立大鼠颅骨损伤的模型 (直径=5mm 的双侧圆形缺损)

麻醉大鼠。麻醉起效后颅骨区备皮、消毒、铺巾并使大鼠呈俯卧位，在大鼠颅骨行 3cm 纵向切口，切开皮肤，皮下组织和肌肉－骨膜层并翻瓣，钝性分离暴露颅骨骨板。用 高速钻机带5mm外径的去骨钻在颅骨颅中缝两侧制造直径为5mm大小的2个圆形全层骨膜骨质缺损。术后 8w 分别处死动物，所有的动物取缺损部位的颅骨，连骨膜一起取下来，置于10%中性福尔马林溶液中保存。

应用：用于研究各种骨填充材料

模型评价

1.高分辨率 micro-CT 量化骨溶解

确定骨吸收的面积和程度：

使用ImageJ软件对溶骨区域进行量化。颅骨重建。区域兴趣（ROI）包括额骨、顶骨和顶骨间的骨头。骨溶解区域概述、测量和记录。

组织病理学

2.病理染色 （做完MicroCT检测的样本，可用于后续病理检测）

（1）成骨染色 Runx2， OCN（IHC）

（2）破骨细胞定量 TRAP染色

（3）HE染色

标志因子水平

3.外周血细胞因子ELISA检测：

Th1细胞因子: IL-2, TNF-α, IFN-γ

Th2细胞因子: IL-4、IL-6、IL-10

Th17细胞因子: IL-17A

统计学分析

应用SPSS软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差（x ±ｓ）表示，采用ｔ检验，组间比较采用单因素方差分析，P<0.05表示有显著性差异。

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