如何构建伪无菌小鼠模型
伪无菌小鼠一般用SPF级小鼠处理后获得，饲养条件理论上也需要SPF级的动物房，比方说温度为18～29℃，日温差≤3℃，相对湿度达40％～70％，新鲜空气换气次数l0次／h，气流速度≤0.18m／s，压差25Pa，洁净度一万级，氨浓度l5mg/m³，噪音≤60dB，照度150～300Lux等等。
考虑到小鼠的性成熟时间是在6-7周龄，所以疾病建模的时间一般会尽量避开这个时间点，但是建伪无菌小鼠模型不受此影响。在建模前务必先把小鼠适应性喂养1-2周，小鼠的胆子太小，换了环境马上开始造模的话小鼠的死亡率会增加，所以造模不差这一周，先让小鼠适应一下环境。
清除小鼠肠道细菌的方法很简单粗暴，给老鼠疯狂的服用多种抗生素，连着吃，不怕细菌死不了。
给小鼠服用的抗生素种类并不固定，每个课题组都有自己的偏好，目前用的比较多的是四联广谱抗生素（ vancomycin, ampicillin, neomycin, 和metronidazole）。稀释抗生素的终浓度为 vancomycin (0.5 g /l), ampicillin(1 g /l), neomycin (1 g /l), metronidazole (1 g /l)。有老师反应万古霉素有点儿小贵，如果经费实在紧张的老师也可以找找其他替代品（可参考文献中的抗生素种类）。
将抗生素按照比例添加到老鼠的饮水中，只要它喝水，抗生素就能进去，而且喝得越多抗生素吃得越多，不用担心万一哪只老鼠不喝水的情况，老鼠没那么聪明。连续喂养4-6周，肠道中的细菌基本上就被消灭的差不多了。也有文献说连续喂14天即可，具体喂养时间没有严格的要求，只要肠道中细菌的清除比例能达到90%以上就行。
在粪菌移植的过程中，小鼠可能会有一定比例的死亡（小鼠粪便移植给小鼠死亡率低，人的粪便移植给小鼠死亡率高），预估死亡率在20-30%，在建模前需要把死亡率计算在里面。假设最终需要每组保留6只小鼠的话，再买老鼠的时候就把每组设置为9只。
伪无菌小鼠是否搭建成功是需要通过检测来评估的，目前常用的评估方法是培养和定量。此部分内容可关注“慕柏生物”公众号查看“小鼠模型系列三：伪无菌小鼠是否构建成功的评判标准”。
参考文献：
Christoph A. Thaiss et al., Persistent microbiome alterations modulate the rate of post-dieting weight regain, N AT U R E, 2 0 1 6
Ciara E.Keogh et al., Myelin as a regulator of development of the microbiota-gut-brain axis,Brain, Behavior, and Immunity, 2021
Yachun Zhang et al., Composition of the murine gut microbiome impacts humoral immunity induced by rabies vaccines, Clin. Transl. Med. 2020
Sunny H. Wong et al., Gavage of Fecal Samples From Patients With Colorectal Cancer Promotes Intestinal Carcinogenesis in Germ-Free and Conventional Mice, Gastroenterology 2017;
