【求助】为什么EMSA没有迁移条带?
我用的是PIERCE的EMSA KIT 阳性对照结果很好,使用HELA细胞所提核蛋白作的预实验也不错,但是用提自神经细胞的核蛋白做却只有探针条带,没有复合物迁移条带.蛋白量是做了梯度的10ug, 20ug, 30ug都没有.操作过程也十分注意避免蛋白受热,电泳是在冰盒中跑的,只是没加甘油,Mg和NP-40! 望高手指点....多谢多谢
我用的是PIERCE的EMSA KIT 阳性对照结果很好,使用HELA细胞所提核蛋白作的预实验也不错,但是用提自神经细胞的核蛋白做却只有探针条带,没有复合物迁移条带.蛋白量是做了梯度的10ug, 20ug, 30ug都没有.操作过程也十分注意避免蛋白受热,电泳是在冰盒中跑的,只是没加甘油,Mg和NP-40! 望高手指点....多谢多谢