想要分析蛋白质单体间通过二硫键形成多聚体(我想做蛋白质的谷胱甘肽化),想用WB的方式来验证,文献中都说需要在非还原性的条件下进行电泳,但是关于这个非还原性条件的定义我不是很明白,文献中写的非还原性条件包括两个:1. 在上样缓冲液中不含巯基乙醇或DTT的聚丙烯酰胺凝胶电泳,即可。
2. 需在非蛋白非变性蛋白电泳上进行,用考马斯亮蓝显色,即可。
我的问题是,到底这两种方法哪个才算是非还原性条件呢?关于做非蛋白非变凝胶电泳,都是用考马斯亮蓝显色,那么我怎么敷一抗呢?是不是我自己的理解有问题啊。
还请各位大佬不吝赐教,感谢感谢,有相关文献更好,谢谢