【求助】EF-1α的启动范围有多大？
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请外边的公司包装了一个过表达慢病毒，目的基因（2310bp）与BFP基因以T2A串联，用EF-1α启动；另外还有个PuroR基因用hPGK启动。
在正式实验中发现除了BFP不表达，但目的基因和PuroR都表达了，请问这有可能是什么原因导致的呢？
对照慢病毒的PuroR和EGFP也都表达了（对照慢病毒上是PuroR与EGFP以T2A串联，用CMV启动。因为没有BFP的对照慢病毒，那个公司就随便拿了一个给我，我也只能将就着用了）
我自己的猜想是，要么目的基因+BFP的长度太长，导致BFP表达效率降低，但是这也不至于一点荧光都没看见吧？或者就是目的基因的表达与BFP互相干扰，亦或是BFP因为某些原因无法在我这个细胞（pc12）内表达
由于专业不是主要做载体构建的，这方面的知识量太过浅薄，还请大家帮忙指点下
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 795
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