求指教,含有SacB基因的大肠杆菌在10%蔗糖平板可正常生长是什么原因?
表达SacB基因的载体构建成功之后(已测序验证),将含有该载体的大肠杆菌DH5α涂布至含有10%蔗糖的LB平板,发现可以正常生长,文献报道含有SacB基因的大肠杆菌在蔗糖浓度为5%或10%就不能生长了。
那可能的原因:
1.表达SacB的启动子太弱,SacB表达量不够?
2.含有10%蔗糖的LB固体培养基配置有问题?我是把LB固体培养基(121℃,20min)和蔗糖(115℃,30min)分开灭菌,倒平板之前混匀加的卡那。
3.大肠杆菌DH5α不适合用于蛋白表达?作为克隆菌株,DH5α的蛋白表达量虽然低,但是也能使蛋白正常表达吧,我用同样的启动子在DH5α表达LacZ基因(3075 bp)都成功了。
有做过相关实验的老师同学还请多多指教
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2115