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genotyping结果中杂合子一条带浅

病理学医学生 · 最后编辑于 2020-05-26 · IP 上海上海
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这个帖子发布于 5 年零 32 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

最近在做小鼠基因型鉴定,结果如图,因为担心后续影响鉴定结果,该怎么改变条件使杂合子在WT位置上的条带变深一点呢?

目前条件:

Taq DNA polymerase(5U/ul)浓度: 2.5U/100ul

MgCl2浓度: 1.5mmol/L

10mM dNTP mix浓度: 0.2mmol/L

引物浓度: 0.2mmol/L

(引物为1,2,3,其中1+3→WT,2+3→KO)


退火温度55℃,退火时间30s,延伸时间60s,循环数35s

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