培养上清蛋白浓缩跑WB--已解决
发布于 2020-04-05 · 浏览 1.0 万 · IP 上海上海
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yj1984ren 推荐本人想通过WB和ELISA两种方法测细胞培养上清HMGB1蛋白水平，蛋白分子量30KDa，用得millipore超滤管 Amicon Ultra-4 10K，正优化protocol：
方法一：只用Amicon Ultra-4 10K超滤离心，4ml上清浓缩成100ul，发现蛋白浓度太高，加上样缓冲液煮完，样品呈固体状，不行
方法二：先用Amicon Ultra-4 10K截留，再用Amicon Ultra-0.5 100K滤过，WB跑不出条带，不行
请大神指点问题出在哪里？
下一步想再试试：先Amicon Ultra-0.5 100K滤过，再Amicon Ultra-4 10K截留
文献上很多这个蛋白上清跑WB，都说用Amicon Ultra-4 10K超滤管，我就是搞不出来
谢谢
最后编辑于 2020-05-10 · 浏览 1.0 万
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