高GC含量PCR扩增难题
目的基因全长2500b左右,序列后端GC含量比较高,载体构建时PCR扩增不出来条带,试过很多酶,KOD plus, 全式金supermix,诺唯赞2 × Phanta Max Master Mix,Takara PrimeSTAR GXL DNA Polymerase, invitrogen platinum PCR SUPERMIX都不行,l两端的引物都选择24bp长度,退火温度不高,分别为59、54摄氏度,大家还有什么建议的酶或方法吗?
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2978