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Real-Time PCR结果目的和内参溶解曲线都有双峰

发布于 2019-09-12 · 浏览 2014 · IP 美国美国
这个帖子发布于 5 年零 241 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

各位战友好!

最近做白色脂肪组织的real-time PCR,发现内参GAPDH的CT值很高,在24-29之间。查了下溶解曲线,发现有双峰,而且大部分比较低平,目的基因的溶解曲线也有双峰,但比较尖锐。图一是扩增曲线,图二是内参的溶解曲线,图三是目的的溶解曲线。

引物没有问题,用测试样本非常漂亮。退火温度是60℃,40循环。

目前考虑是否模板浓度太低导致的?

由于样本比较宝贵,想请教下原因,及解决办法。

先谢谢各位了!

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最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2014

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