【求助】用内参基因引物跑PCR,结果Ct值过高且熔解曲线杂乱
今天拿周末刚反转录的cDNA去跑qPCR,内参基因选的是β-actin
结果显示Ct值偏高(普遍>30)且几乎没有平台期,熔解曲线更是一团糟,虽然基本都是单峰,但各个峰对应的熔解温度差异极大

这可能是由于什么原因导致的?又应该怎么调整反应体系?希望各位大佬帮忙解答一下,万分感谢
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2369
今天拿周末刚反转录的cDNA去跑qPCR,内参基因选的是β-actin
结果显示Ct值偏高(普遍>30)且几乎没有平台期,熔解曲线更是一团糟,虽然基本都是单峰,但各个峰对应的熔解温度差异极大
这可能是由于什么原因导致的?又应该怎么调整反应体系?希望各位大佬帮忙解答一下,万分感谢
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