空白条带怎么办?!!!
这个帖子发布于 6 年零 150 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
我跑胶后分开转膜，目的蛋白是40kd和60kd, 40kd的转膜条件是150mA,1.5h, 60kd的转膜条件是150mA,2h,分开转膜，互不干扰。转膜后marker清晰。发光时40kd的可以发出来，条带正常，但是60kd的却没有条带，只有marker 的位置黑乎乎一片。由于40kd能做出来，所以可以排除二抗，上样、配胶的问题。
我之前用相同的条件做western blot，可以正常出条带，这两回突然就不行了，不知道原因在哪里，我换了pvdf膜，之前是0.22μm的膜，能发出来，但是膜用完了，现在用0.2μm和0.45μm的试过了，但是都不行。丽春红染色液染色，第一次试验时没有条带，第二次能看到很弱的条带。
现在怀疑是转膜的问题，哪位大神能帮我分析分析，跪谢！
