CO-IP实验蛋白交联问题
请教各位关于CO-IP实验中蛋白交联的问题。
我的目标蛋白和它的底物作用非常弱,所以希望蛋白交联后做CO-IP。
有以下几个问题希望向大家请教:
1、甲醛交联的条件。是使用多聚甲醛还是普通甲醛,用什么浓度,多少温度交联多长时间?
2、解交联的条件。是否通过SDS-Buffer 100度5min就可以解交联?还是需要增加解交联的步骤?
3、交联后是否会存在假阳性,该如何设计对照组避免假阳性?
非常感谢大家!!!
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 3213
请教各位关于CO-IP实验中蛋白交联的问题。
我的目标蛋白和它的底物作用非常弱,所以希望蛋白交联后做CO-IP。
有以下几个问题希望向大家请教:
1、甲醛交联的条件。是使用多聚甲醛还是普通甲醛,用什么浓度,多少温度交联多长时间?
2、解交联的条件。是否通过SDS-Buffer 100度5min就可以解交联?还是需要增加解交联的步骤?
3、交联后是否会存在假阳性,该如何设计对照组避免假阳性?
非常感谢大家!!!
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