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大鼠胰腺MPO及Foxp3免疫组化,做出来不行啊(有图),**大神们支招

发布于 2016-09-23 · 浏览 4380 · IP 福建福建
这个帖子发布于 8 年零 229 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

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大鼠胰腺MPO及Foxp3免疫组化,做出来不行啊(有图),**大神们支招,以下是步骤

1. 温箱60°烤片2h

2. 脱蜡和水化:二甲苯Ⅰ和Ⅱ各30min,无水乙醇、95%乙醇、75%乙醇,各3min,双蒸水3min

3. 柠檬酸盐缓冲液,高压锅煮沸,冒气3min,自然冷却

4. 3%双氧水,室温作用10min,洗片

5. 5%BSA封闭,室温30min,PBS洗片3次

6. 加一抗,4°过夜

7. 复温30min,PBS洗次,加便捷式二抗,室温30min后洗片3次

8. 滴加DAB,镜下观察,适度后停止

9. 苏木素复染

10. 75%乙醇、95%乙醇、无水乙醇,各3min

11. 封片

自己感觉非特异性很多,不知道那么多染上黄色的是什么,二抗孵完,在镜下看就可以看到那些东西,试过不加

DAB,直接然苏木素,镜下看就有黄的了,如下图:

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最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 4380

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