大鼠胰腺MPO及Foxp3免疫组化,做出来不行啊(有图),**大神们支招
大鼠胰腺MPO及Foxp3免疫组化,做出来不行啊(有图),**大神们支招,以下是步骤
1. 温箱60°烤片2h
2. 脱蜡和水化:二甲苯Ⅰ和Ⅱ各30min,无水乙醇、95%乙醇、75%乙醇,各3min,双蒸水3min
3. 柠檬酸盐缓冲液,高压锅煮沸,冒气3min,自然冷却
4. 3%双氧水,室温作用10min,洗片
5. 5%BSA封闭,室温30min,PBS洗片3次
6. 加一抗,4°过夜
7. 复温30min,PBS洗次,加便捷式二抗,室温30min后洗片3次
8. 滴加DAB,镜下观察,适度后停止
9. 苏木素复染
10. 75%乙醇、95%乙醇、无水乙醇,各3min
11. 封片
自己感觉非特异性很多,不知道那么多染上黄色的是什么,二抗孵完,在镜下看就可以看到那些东西,试过不加
DAB,直接然苏木素,镜下看就有黄的了,如下图:
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 4380