免疫组化（荧光）之二抗的选择该如何进行（1）？

刚接触免疫组化的小伙伴多数对二抗的选择不太理解，导致后续实验功亏一篑，今天我就来详细的讲一下，希望对大家有所帮助：

首先免疫组化或免疫荧光原理大致相同，仅在显示方法上有所区别，这些我会另写文章给大家讲解的。

不管是组化还是荧光，都分直接法与间接法，甚至按照步骤分，还有三步法，四步法等；对于目前大家常用的需要用到一抗二抗的就属于间接法。

直接法：就是直接在特异性抗体上标记辣根过氧化物酶/荧光素，通俗一点就是用的一抗就是已经被标记了的，就不需要所谓的二抗了。

间接法：一抗不标记任何东西，需要用标记了的二抗与一抗进行反应才能显色/光

那么对于间接法的二抗选择该如何进行呢？

1.二抗的选择与一抗有必要关系

即二抗的选择是由一抗所决定，一抗若来源于兔，那么二抗必须来源于非兔的抗兔抗体。

2.一抗的选择也间接影响着二抗选得是否正确

即一抗来源必须与目标组织种属不同，一旦相同，那么会直接导致二抗咋选都是错的

注意：一抗是特异性抗体（只对目标抗原起作用），二抗是只对某个种属有作用

举个例子：如果你检测的是小鼠组织CD68，选用的是间接法，那么CD68的抗体不能来自小鼠，可以来自非小鼠的其它种属；假设你选则的是兔源的CD68抗体，那么二抗就必须是抗兔的，比如羊抗兔、驴抗兔等。

上述目前只讲了种属的选择，下回在这个基础上咱再讲一讲亚类的选择，不过懂了上面，二抗的选择基本上算过关了（差一丢丢火候）……

来给大家出个题：

现在我要做犬的肺CD68，选用间接法，那么一抗和二抗我该怎么选？

开放性的，只要原理对就算对，不用管市面上有没。