HbA1纯化
向大家请教一个问题哈。我们组最近在纯化糖化血红蛋白(HbA1c)。由于是第一次纯化,需要自己建立体系。我看到贵公司有纯化糖化血红蛋白的方案(详见附件,P21)。由于实验条件所限,需要更换一些条件。
1.资料中提到用Mono S柱子进行纯化,可否用SP柱子替换,因为二者和阳离子结合的材料是相同的,HbA1C纯化主要是根据蛋白和其他蛋白电荷不同。
2.资料中提及用415nm去检测蛋白,原因是血红蛋白含有亚铁血红素分子,我可否用传统的A280检测替代
3.洗脱液中含有LiCl,我可否用NaCl,还有整个缓冲液体系,我能否用PBS替代呢,我在别的文献中有看到。
还请大家多帮帮忙哈