lncRNA设计引物，RT, qPCR相关问题。
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本人最近通过高通量测序，筛选出了一些差异性lncRNA。可是遇到一些问题，请大家帮忙分析解决一下：
1. lncRNA设计引物时是否根据公司给的序列直接设计即可？因为lncRNA有异构体，怎样找到该lncRNA的异构体？设计引物是否应该选取该异构体共同的部分进行设计？
2.本人想用原来拿去测序的标本进行验证，但是原测序标本加trizol放至在负80度，现在提RNA基本降解，是否可以换取新的标本再做验证？
3.提取标本中RNA中DNA污染严重，大家都是怎么处理的？我看网上说DNaseI，过柱，螯合剂对RNA均有降解，请问大家用什么方法，什么条件去除RNA中DNA污染？提RNA什么样的质量做逆转录没有问题？
4.DNA污染去除不了，lncRNA引物又不能设计成跨外显子，怎样在做qRT-PCR时排除DNA污染对结果的干扰？
5.qRT-PCR时，人的标本大家都选什么做内参。
6.大家有什么推荐的预测lncRNA及其靶基因mRNA、microRNA的网站吗？
急盼大家回复，小女子感激不尽，谢谢。
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