电泳时蛋白条带弥散

不知为什么近几次跑电泳时，感觉浓缩胶没什么作用，样品依然很弥散，只是配的胶的浓度从8%提高到12%，各种溶液没有改变，，我用的上是20ul样品加20ul 2*加样缓冲液，混匀后煮沸5分钟，样品加样前12000转离心1分钟，现在我的电泳液只用一次，但问题依然没有解决。请各位帮忙。