【求助】RT问题
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请帮帮我看看我的设计对否：我想从总RNA里逆转录一个目的基因，其CDS长618bp，由于其侧翼序列无想克隆进去的载体的POLYLINKER里的酶切位点，我选择其中两个酶切位点，将其识别序列分别引入用于扩增618bp的CDS的引物的两端，希望扩增出来后，用双酶切的方法定向的插入到我的载体里，我的问题是我用PRIMER PRIMIER 5.0设计的引物长18bp，引入酶切位点后分别长26bp，和24bp，内切酶识别序列8bp和6bp和模板是不配对的，这样能用RT-PCR做出来吗？
